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兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/9/2瀏覽:125次
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  兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  BS-4142 兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  本試劑盒采用雙抗體夾心法測定兔血清、血漿等樣本中TNF-α濃度。通過預(yù)包被TNF-α抗體的微孔板與樣本中抗原結(jié)合,再與HRP標(biāo)記的二抗形成復(fù)合物,經(jīng)TMB底物顯色后,通過450nm波長測定吸光度(OD值),標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度。

  二、試劑盒組成

  組分規(guī)格(96T)儲存條件

  預(yù)包被微孔板1塊(96孔)4℃(短期)/-20℃(長期)

  標(biāo)準(zhǔn)品(TNF-α)1瓶(1.0mL)-20℃避光保存

  HRP標(biāo)記抗體1瓶(8.0mL)4℃避光

  TMB底物液1瓶(6.0mL)4℃避光

  終止液1瓶(6.0mL)室溫

  三、實驗步驟

  樣本處理

  血清/血漿:4℃靜置2小時或過夜,1000×g離心20分鐘,取上清分裝保存(-20℃≤1個月,-80℃≤2個月)。

  避免溶血或反復(fù)凍融。

  檢測流程

  加樣:標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋(1.37-1000pg/mL)及樣本各100μL/孔,37℃孵育90分鐘。

  洗滌:PBST洗滌3次,每次拍干。

  顯色:加入TMB底物避光反應(yīng)15分鐘,終止液終止后30分鐘內(nèi)測OD值。

  四、注意事項

  試劑使用前需平衡至室溫,不同批次不可混用。

  酶標(biāo)儀預(yù)熱至450nm,建議雙孔復(fù)測以減少誤差。

  顯色液避免強光照射,終止后及時讀數(shù)。

  五、結(jié)果分析

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/mL)為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,樣本濃度通過曲線擬合值乘以稀釋倍數(shù)計算。

  六、儲存與有效期

  未開封試劑盒:按標(biāo)簽溫度保存(-20℃或4℃),有效期12個月。

  已拆封微孔板:需干燥劑密封保存于-20℃,建議1個月內(nèi)用完。

  注:以上資料僅供參考,不作為實驗依據(jù),具體產(chǎn)品說明請咨詢品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。

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